シングルビーム分光光度計とデュアルビーム分光光度計の違い
分光光度計は、波長の関数として光強度を測定し、水溶液中の化合物の濃度を測定するために一般的に使用されます。分光光度計の種類に応じて、さまざまな波長の光を分析できます。
波長範囲と検出限界は、適切な分光光度計を選択する際に考慮すべき最も重要な要素であることは間違いありませんが、次のような他の重要な基準があります。
1.測定したい製品の密度、形状、またはサイズ
2.分析作業範囲
3.サンプルスループット
4.データ品質
5.カスタマイズ可能および/または事前設定された方法オプション
6.測定時間
分光光度計には、主にシングルビームとダブルビームの 2 種類があります。その名前が示すように、2 つの装置の主な違いは、分析に使用される光線の数です。
シングルビーム
シングルビーム分光光度計では、光源からのすべての光波が 1 つのビームとしてサンプルを通過します。測定器は、サンプル ホルダーに基準を配置することによって標準化され、結果の値が後続のサンプル測定値から差し引かれ、溶媒とセルからの影響が除去されます。試料を透過した後の光束の検出感度は、分割されていない光束を使用するため高く、したがって全体に高いエネルギーが存在します。
シングルビーム 紫外線 -ヴィス 分光光度計は、190 ~ 750 nm の波長範囲で測定できますが、1100 nm に達するものもあります。紫外線 領域は、340 nm 未満の任意の波長と見なされ、核酸、精製タンパク質などの測定に役立ちます。たとえば、有機分子。
ダブルビーム
逆に、ダブルビーム分光光度計の光源からの光は 2 つのビームに分割され、一方のみがサンプルを通過し、もう一方は参照のみを通過します。各単色ビームは、ハーフミラー デバイスによって 2 つの等しい強度のビームに分割されます。1 つのビーム (サンプル ビーム) は、調査対象の化合物を透明な溶媒に溶解した溶液を含むキュベットを通過します。もう 1 つのビーム (参照) は、溶媒のみを含む同一のキュベットを通過します。これらの光線の強度は、電子検出器によって測定され、比較されます。ダブルビーム分光光度計は、通常、190 ~ 1100 nm の測定範囲を提供します。
分光光度計の追加のタイプとは見なされませんが、スプリットビーム機器はダブルビーム分光光度計に似ています。ただし、代わりに、1 つの検出器を使用しながら参照とサンプル間の光路を急速に切り替えるビームスプリッターに依存しています。
長所と短所
今日の最新の実験室ではダブルビーム分光光度計がより一般的な選択肢ですが、シングルビーム分光光度計にはまだいくつかの利点があります。シングルビーム分光計の費用対効果は最大の利点であり、他の分光光度計と比較して設置面積が小さいことです。シングルビーム分光光度計は、ソースビームの非分割による高エネルギースループットにより、高感度の検出も示します。
一方、アプリケーションで安定性が求められる場合、シングルビーム分光光度計は最適な選択肢ではない可能性があります。これは、機器が電子回路の変動、電圧変動、機械部品の不安定性、または光エネルギーのドリフトなどの外乱を補償しないためです。ソース。このようなドリフトは、結果に異常な変動を引き起こします.2
一方、ダブルビーム機器は、ソースパワーの変動を補正し、信号対雑音比を大幅に改善し、溶液サンプルを希釈してガスを使用して測定するための拡張を可能にします。
一般に、ダブルビーム分光光度計は、ビームがサンプルと参照溶液を通過する際の光強度の損失を自動的に補正するため、動作が速く、再現性の高い結果が得られます。さらに、ランプのウォームアップ時間がほとんどまたはまったくないため、結果のスループットが向上するだけでなく、ランプの寿命も節約できます。
ダブル ビーム分光光度計は、シングル ビーム バージョンよりもかなり高価ですが、ランプの寿命を考慮すると、機器の寿命コストを削減できます。