サル痘ウイルス感染の検出に関する検査ガイドライン
世界保健機関 (WHO) の事務局長は、2022 年 7 月 23 日に、エスカレートする世界的なサル痘の発生を、国際的に懸念される公衆衛生上の緊急事態 (PHEIC) であると宣言しました。 8 月 17 日時点での死亡者数。報告されたほとんどの症例 (渡航歴あり) は、ヨーロッパと北アメリカの地域に旅行しました。
サル痘は、サル痘ウイルス (MPXV) の感染によって引き起こされるまれな疾患です。MPXV は、天然痘を引き起こすウイルスと同じファミリーに属するエンベロープを持つ二本鎖 DNA ウイルスです。このウイルスは、体液、皮膚の病変、または発熱、頭痛、筋肉痛などの症状を伴う内部粘膜表面との接触を介して伝染する可能性があります。サル痘の潜伏期間は通常 6 日から 13 日ですが、5 日から 21 日 (約 3 週間) かかることもあります。
WHO によると、最良の診断標本は発疹 (皮膚、体液、痂皮) から直接採取するか、実行可能な場合は生検です。抗原や抗体の検出などの他の方法は、オルトポックス ウイルスを区別しないため、役に立たない場合があります。
検査室でサル痘の疑い例、可能性例、または確定例の検体を操作する際には、リスクベースのアプローチが推奨されます。したがって、リスクグループ 3 の病原体として分類される MPXV の存在を検出するための手順は、以下に示す機器のリストを使用して、バイオセーフティレベル 2 の実験室で実行する必要があります。
サル痘ウイルス検出のための機器ガイド
検体と試薬の保管
MPXV 標本は、2°C ～ 8°C で冷蔵することをお勧めします。または、採取後 1 時間以内に冷凍 (-20°C 以下) する必要があります。輸送時間が 7 日を超える場合、検体は -20°C 以下で保存する必要があります。一方、試料の長期保存には-70°Cが推奨されます(>回収から60日）。
Biobase Laboratory Refrigerators、Laboratory Freezers、および Ultra-low Temperature Freezers には、適切に設計された冷凍システムと、重要な保管条件を必要とする温度に敏感な生体サンプルの保管に適した高品質の材料が装備されています。
サンプルの取り扱いと準備
MPXV は、汚染された材料または不適切な方法により、検体処理段階で伝染する可能性があります。その結果、バイオセーフティ対策の強化が観察されます。サンプルを不活化する前に、MPXV が疑われる患者からの検体は、機能的なクラス II バイオセーフティ キャビネットで準備する必要があります。ただし、これは適切に不活化された標本には必要ありません。
バイオセーフティ キャビネットが提供する保護とは別に、Biobase クラス II 生物学的セーフティ キャビネットは、NSF 49 および EN 12469 に準拠しており、使いやすい機能を備えており、安全性を向上させるために、外部および内部のすべての塗装面に抗菌粉末がコーティングされています。検体の液体成分と固体成分を分離するには、遠心分離機が必要です。手順に不可欠な場合は、安全カップまたは密閉されたローターを使用することをお勧めします。
検出と分析
MPXV感染を確認するために、核酸増幅検査（NAAT）が実施されます。ユニークなウイルス DNA シーケンスを検出するには、PCR リアルタイムまたは従来のポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) が使用されます。ウイルス検出には 2 つのステップがあります。最初の PCR はオルソポックス ウイルスを検出しますが、2 番目の PCR (またはシーケンス) が MPXV を特異的に検出する間、種を特定しません。
リアルタイム PCR サーマルサイクラーは、ウイルス分析用の核酸を効率的に増幅します。Biobase は、PCR プログラムの入力、モニタリング、および分析からスタンドアロン操作用のコンピューターを内蔵した新しい Swift™ PCR サーマル サイクラーを提供します。